血清抗SS-A(Ro)抗体简介:由于慢性炎症长期不愈,宫 抗SS-A(Ro)识别的表位位于细胞内与小核糖核酸hY1、hY3、hY4、hY5形成复合物的两种蛋白质(60×103和52×103)上。这种核糖核酸蛋白颗粒的功能目前还未知,患者血清内的自身抗体可能针对其中一种,或者更常见的是同时针对两种蛋白复合物。从分子生物学观点看,两种蛋白及它们基因高度保守,有特征性重复,两者间并无密切联系。因此,同时出现抗两种蛋白的抗体并非由于交叉反应。
禁忌人群:
注意事项:
抗SS-A(Ro)经常能在ANA阴性的SLE患者中查及,许多基质特别是常规甲醇固定的Hep-2细胞,在IFT反应中,抗SS-A不以ANA的形式表现。这是因为其滴度低,部分抗原位于胞质或者在固定的过程中抗原被洗掉。如临床怀疑为SLE,而ANA阴性,应检测抗SS-A(Ro)以及抗磷脂抗体。
虽然已知抗SS-A(Ro)有两种不同的靶抗原(Ro52、Ro60),但大多数检测方法,如免疫扩散、反相免疫电泳、以纯化抗原建立的ELISA法,不能区分它们。免疫印迹法和以Ro52、Ro60两种重组抗原建立的ELISA法,可以分别检出两种抗SS-A(Ro)。根据免疫印迹法统计的资料报道,Ro52抗体与干燥综合征有更强的联系,而Ro60抗体与SLE相关性更密切。但由于30%的Ro阳性血清免疫印迹法为阴性,所以该结论有局限性,特别是由于Ro60抗原表位是部分构象性的,在免疫印迹法中被破坏。如采用足够灵敏的方法,绝大多数Ro阳性血清可以检测到两种抗体。
指数解读:
检查作用:
抗SS-A(Ro)抗体对干燥综合征等自身免疫疾病的诊断有作用。40%-90%原发性干燥综合征患者。约75%先天性心脏病和新生儿狼疮患者。抗SS-A阳性/抗SS-B阴性患者相比,抗SS-A和抗SS-B阳性的SLE患者,较少肾脏损伤,抗dsDNA也较少阳性,这种抗体模式也常在迟发性SLE患者中见到。
检查过程:
抗SS-A(Ro)抗体的测定原理:用间接免疫荧光法检测时,抗SS-A/Ro、抗SS-B/La阳性结果表现为核的细斑点型免疫荧光,但抗SS-A/Ro引起的荧光亮度较弱。其操作与原理均与抗核抗体检测相同。双向免疫扩散法仍为抗SS-A/Ro、抗SS-B/La的常用检测方法,但敏感性不高。目前常用免疫印迹法,其原理可参看抗Sm抗体测定。最近也有人用基因重组的52kD和60kD蛋白质建立ELISA法测定抗SSA/Ro抗体,用重组48kD蛋白质建立ELISA法测抗SS-A/La抗体,其敏感性较之免疫扩散法约高千倍,但因特异性问题(重组抗原中常含有细菌产物)未广泛应用。一种敏感性和特异性都很高的方法是放射免疫沉淀法,此法是用放射性36S-蛋氨酸或32P-正磷酸盐标记组织培养细胞,标记上36S的代表所有蛋白质,标记上32P的代表磷酸化蛋白,此外,细胞内RNAs也标记上32P。将待测血清与标记上放射性核素的组织细胞提取物混合,抗体与标记抗原反应,形成免疫复合物,用葡萄球菌A蛋白使免疫复合物沉淀,溶解后行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射自显影,与自身抗体结合的放射性标记核抗原形成的条带即可显现出来,参照标准品形成的条带进行分析,即可做出诊断。此法目前还只限于实验室研究。
试剂:血清 1ml。
操作方法:
(1)沉淀法:与抗Sm、抗RNP或抗SS-B等类似的检测方法不同,小牛、兔、胸腺提取物由于没有足够浓度的Ro抗原,不能用于免疫双扩散和反相免疫电泳,而主要从人脾组织或人培养细胞(WI-L2)获得。沉淀带与参考血清相同,核实为SS-A特异性。
(2)免疫印迹法:抗原采用细胞培养物如HeLa、MolT-4。当与参考血清有两条相同典型带(60×103和52×102)时,可确证为抗SSA(Ro)阳性。
(3)ELISA:可用亲和纯化或重组52×103和60×103蛋白,或相对纯化的hY-RNP颗粒作抗原。