溶血性乙型脑炎补体结合试验 检查组合简介:由于慢性炎症长期不愈,宫 流行性乙型脑炎(简称乙脑)是由乙型脑炎病毒引起,该病毒产生的血凝素能使雏鸡、鸽、鹅和绵羊等红细胞凝集。成熟的乙脑病毒有V1、V2和V3三个结构蛋白,用相应的单克隆抗体证明,V3有4个与免疫相关的抗原点,其一为中和抗体决定簇,另两个为组和亚组特异性抗原决定簇,还有一个既有血凝也有中和抗原决定簇。此外,乙脑病毒还有型特异性的可溶性补体结合抗原。乙脑患者受上述病毒抗原的激发,病后血中可产生血凝抑制抗体,中和抗体和补体结合抗体,据此检测患者上述三种抗体可作为该病的血清学诊断指标,通常用免疫测定或免疫荧光技术检测特异性IgM抗体,具有早期诊断意义。
禁忌人群:
注意事项:
乙脑中和抗体是证实乙脑感染的重要指标,但其检测常用小鼠、地鼠肾以及鸡胚细胞等进行,其原则是该抗体与病毒结合后,使病毒失去感染力,据此分别根据小鼠死亡率、地鼠肾细胞培养的病变以及鸡胚单层细胞空斑减少,分别测出抗体效价,方法虽敏感,但操作麻烦,一般检测难以完成,需送专业病毒研究所检测。
指数解读:
检查作用:
溶血性乙型脑炎补体结合试验对流行性乙型脑炎具有早期诊断意义。乙脑患者补体结合抗体一般出现较晚,据报道发病1-2w,该抗体阳性者仅12.8%,仅维持半年,凡受检者该抗体阳性必然是新近感染,故单份恢复期血清大于或等于1∶16即有诊断意义。一般双份血清检测所得抗体效价有4倍以上增长即有诊断价值。如双份血清的抗体效价均为1∶8或更高,而恢复期血清并无4倍以上增长,则须分析是否急性期标本采取时间过晚,故需重行采集恢复期血复查,籍以判定抗体效价与本次感染的关系。如仍有疑问则需用中和试验加以对比核实。
检查过程:
1)抗原制备方法同血凝素,并以健康鼠脑同法制备正常组织抗原。
(2)鼠抗乙脑病毒血清,一般要求效价为l∶64或更高。 操作方法:
(1)绵羊红细胞悬液,溶血素和补体均应先行滴定,各配成最适工作浓度。
(2)抗原滴定,用倍比稀释的抗原和抗血清作方盘滴定,凡能与最高稀释度血清结合而出现完全不溶血的最高稀释度抗原量为1U,如1∶16为1U抗原,实验用2U即1∶8稀释抗原。
(3)正式试验:受检血清经56℃30min灭活后,先作1∶4或1∶8稀释,以免高浓度血清导致非特异性结合,继作倍比稀释,按补体结合试验常规操作。凡不溶血的为阳性,溶血为阴性,对照管结果应符合要求。结果计算是以呈现阳性的受检血清最高稀释度为该受检血清的补体结合抗体效价