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特异性脂酶染色

特异性脂酶染色简介:由于慢性炎症长期不愈,宫 阳性反应几乎仅出现在各阶段的粒细胞中,比POX更具特异性,AS-DCE又称为粒细胞特异性酯酶。粒细胞内的氯醋酸AS-D萘酚酯酶水解基质液中氯醋酸AS-DCE萘酚后产生萘酚AS-D,后者再与稳定的重氮盐偶联,生成不溶性红色沉淀,定位于胞质中。

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禁忌人群

禁忌人群:

注意事项

注意事项:

  染色温度以38~39℃,此时酶反应强而无明显扩散,并且萘酚和坚牢紫酱GBC较低温时易溶解。

指数解读

指数解读:

阴性:
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阳性:
正常:阳性反应为红宝石色颗粒,定位于胞浆中。

检查作用

检查作用:

特异性酯酶又称粒细胞酯酶,主要分布在粒细胞和肥大细胞内。原粒细胞为阴性或弱阳性反应,早幼粒细胞和中幼粒细胞呈强阳性反应,分叶核粒细胞酶活性减弱。嗜酸性粒细胞呈阴性,嗜碱性粒细胞、单核细胞和肥大细胞呈阴性或弱阳性反应。巨核细胞、血小板、浆细胞、红系细胞及淋细胞呈阴性。  本染色法主要用于鉴别急性白血病类型。急性粒细胞白血病时,原粒细胞和幼稚粒细胞均呈一定程度阳性,成熟粒细胞酶活性下降。急性单核细胞白血病和急性淋巴细胞白血病时呈阴性。急性粒-单核细胞白血病时,部分白血病细胞(原粒和早幼粒细胞)呈阳性,有些白血病细胞(原单核和幼单核细胞)呈阴性。

检查过程

检查过程:

(1)DAB染色步骤:干燥骨髓(血)片用戊二醛-甲醛固定液固定2min,生理盐水漂洗后保存于盐水内直至下一步染色止。置基质液中孵育3min,0.05mol/LTris-HCl(pH7.3~7.6)快速漂洗3次,置5.0g/L,硝酸铜液内2min,生理盐水漂洗,干后直接镜检或经复染后镜检。

(2)改良巴氏复染步骤:

①DAB染色完毕后标本仍保存于生理盐水中,直至下步染色开始。

②在苏木精染液内染1min,取出后水洗。

③浸入稀盐酸乙醇液内0.5min,水洗2min。

④稀碳酸锂内1min,水洗2min。

⑤依次在50%、70%、80%、95%乙醇内脱水各0.5min。

⑥在橘黄G6中染1min。

⑦95%乙醇内浸洗2次,每次10s。

⑧在EA50液内染10min。

⑨95%乙醇内浸洗2次,每次3min。

⑩无水乙醇内浸洗2次,每次1min。

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