血清蛋白电泳简介:由于慢性炎症长期不愈,宫 蛋白质在碱性条件下带不同量的负电荷,在电场中由阴极向阳极泳动。醋酸纤维薄膜和琼脂糖凝胶是目前最常采用的两大介质。由于白蛋白等电点的差异,电泳后由正极到负极可分为,白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β球蛋白和γ球蛋白五个区带,血清蛋白电泳初步了解血清白蛋白中主要组分的一种技术方法,通过血清蛋白电泳来反映肝细胞损伤程度和病变范围。也可用于反映其他疾病如肾脏疾病,风湿免疫系统疾病等。
禁忌人群:
注意事项:
1.空腹12小时,抽取静脉血化验,标本一定要新鲜血液。
2.化验前要告知医生近期所服用的药物以及近期的生理改变。
3.下列情况可出现生理性升高:
(1)α1-球蛋白升高可见于妊娠6个月后;
(2)α2-球蛋白升高可见于出生1~6个月的婴儿,妊娠4~6个月中度升高,7~9个月显著升高;
(3)β-球蛋白升高见于婴儿出生后、妊娠4~6个月;
(4)γ-球蛋白升高见于预防接种免疫疫苗后。
指数解读:
- 正常值:
高于正常值:
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低于正常值:
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检查作用:
通过血清蛋白电泳可以反映肝细胞损伤程度和病变范围,也可用于反映其他疾病如肾脏疾病,风湿免疫系统疾病等。
检查过程:
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(1)将缓冲液加入电泳槽内,调节两侧槽内的缓冲液,使其处于同一平面。
(2)醋酸纤维素薄膜的准备:取醋酸纤维素薄膜(2cm×8cm)在毛面的一端(负极侧)1.5cm处用铅笔轻划一横线,做点样标记。编号,并标明正、负极后,将薄膜置于巴比妥-巴比妥钠缓冲液中浸泡,待充分浸透后(一般为20min)取出,夹于洁净滤纸中间吸去多余的缓冲液。
(3)将醋酸纤维素薄膜毛面向上贴于电泳槽支架上拉直。用微量吸管吸取无溶血血清3~5μl于横线处沿横线加样,样品应与薄膜的边缘保持一定的距离,以免电泳图谱中的蛋白区带变形,待血清渗入薄膜后,反转薄膜,使光面朝上,平直地贴于电泳槽支架上,用双层滤纸或四层纱布将薄膜的两端与缓冲液连通,稍待片刻。
(4)接通电源,注意醋酸纤维素薄膜上的正、负极,切勿接错。电压90~150v,电流0.4~0.6mA/cm(不同的电泳仪所需电压,电流可能不同,应灵活掌握),夏季通电45min,冬季通电时间稍长,约为60min,电泳区带展开约25~35mm即可。
(5)染色:通电完毕,取下薄膜直接浸于丽春红S染液或氨基黑10B染色液中,染色5~10min(以白蛋白区带染透为止),然后在漂洗液中漂去剩余染料,直至背景无色为止。